全身性CETP轉(zhuǎn)基因小鼠模型
討論與結(jié)論
CETP基因的缺陷是導(dǎo)致高脂蛋白血癥(HALP1)的原因之一，與靜脈血栓形成(VT)具有一定的關(guān)聯(lián)性，也與高HDL-C水平和低冠狀動脈疾病風(fēng)險具有相關(guān)性。
生物安全性
評價驗證
CETP轉(zhuǎn)基因小鼠采用PCR方式進行鑒定。
（1）引物信息：見表2
（2）PCR結(jié)果：如紅色箭頭所示， PCR 樣品的條帶大小約為2324bp，該條帶為轉(zhuǎn)基因條帶。
（3）測序結(jié)果：經(jīng)PCR產(chǎn)物的測序比對，證實人源CETP基因已成功轉(zhuǎn)入小鼠。
制備方法
模型背景：LDLR-/-小鼠
模型制作方法：
（1）全身性過表達轉(zhuǎn)基因載體：
通過將構(gòu)建好的表達元件插入進PiggyBac 轉(zhuǎn)座子系統(tǒng)的兩個ITR 元件之間，然后將構(gòu)建好的轉(zhuǎn)基因載體和轉(zhuǎn)座酶cRNA 共注射進小鼠的受精卵中，即可獲得高陽性率及高表達率轉(zhuǎn)基因小鼠。
插入基因為人源CETP基因，Gene ID：1071，位于：Chromosome 16: 56,961,850-56,983,845 forward strand。
（2）CETP 轉(zhuǎn)基因小鼠構(gòu)建：
研究背景
心血管疾病（Cardiovascular diseases，CVD）是人類死亡的主要原因之一，血清中脂蛋白水平是心血管疾病發(fā)展最重要的危險因素/預(yù)測因素之一。其中高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C) 和甘油三酯(TG)水平是重要指標。HDL-C是參與膽固醇逆向轉(zhuǎn)運和膽固醇酯在脂蛋白之間轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵成分，其水平與冠心病風(fēng)險呈負相關(guān)，并被解釋為預(yù)測CVD風(fēng)險的關(guān)鍵指標。而TG水平升高也被認為是CVD發(fā)展的獨立風(fēng)險標志。CETP基因編碼的蛋白質(zhì)存在于血漿中，在脂蛋白代謝中起著重要作用，促進膽固醇酯從HDL-C向低密度脂蛋白(LDL)以及富含三甘油三酯的極低密度脂蛋白(VLDL)的凈轉(zhuǎn)運，以及TG從VLDL到高密度脂蛋白的等摩爾轉(zhuǎn)運。該基因的缺陷是導(dǎo)致高脂蛋白血癥(HALP1)的原因之一。CETP與靜脈血栓形成(VT)風(fēng)險之間也存在關(guān)聯(lián)性，和血漿凝固性之間也有關(guān)聯(lián)。CETP不同轉(zhuǎn)錄變異型與高HDL-C水平和低冠狀動脈疾病風(fēng)險具有相關(guān)性。
模型信息
中文名稱:全身性CETP轉(zhuǎn)基因小鼠模型
英文名稱:CETP transgenic mouse model
類型:心血管疾病動物模型
分級:NA
用途:用于高脂蛋白血癥(HALP1)的研究。
研制單位:中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實驗動物研究所
保存單位:中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實驗動物研究所
